MEM(Minimum Essential Medium)是一种基础合成培养基,由Harry Eagle于1959年开发,旨在为哺乳动物细胞提供最低必需的营养成分。其特点是配方简单、成分明确,适用于常规细胞培养和病毒学研究。
基础营养组成:
含 13种必需氨基酸 + 8种维生素 + 无机盐 + 葡萄糖。
不含非必需氨基酸(部分改良版本如MEM NEAA已添加)。
缓冲系统:
标准含 NaHCO₃(需5% CO₂),部分版本含 HEPES(适合无CO₂操作)。
低血清适应性:
可在 5-10% FBS 条件下支持细胞生长(部分细胞可低至2%)。
| 细胞类型 | 应用场景 |
|---|---|
| 贴壁细胞系 | HeLa、Vero、CHO、NIH/3T3 等常规细胞系 |
| 病毒培养 | 腺病毒、疱疹病毒扩增 |
| 原代细胞 | 成纤维细胞、某些上皮细胞(需优化血清) |
| 转染实验 | 瞬时/稳定转染(因成分简单,背景干扰低) |
| 成分 | 浓度/含量 | 作用 |
|---|---|---|
| 葡萄糖 | 1.0 g/L(低糖)或 4.5 g/L(高糖) | 能量供应 |
| L-谷氨酰胺 | 2 mM(部分版本需补充) | 支持蛋白质合成(不稳定,需定期添加) |
| NaHCO₃ | 2.2 g/L(高CO₂需求) | 维持pH 7.2-7.4(5% CO₂) |
| 酚红 | 0.015 g/L | pH指示剂(黄→红=酸性→中性) |
| 参数 | MEM | DMEM | RPMI-1640 |
|---|---|---|---|
| 营养水平 | 基础(最低必需) | 高(2×氨基酸/维生素) | 中等(侧重悬浮细胞) |
| 葡萄糖 | 1.0或4.5 g/L | 4.5 g/L(高糖) | 2.0 g/L |
| 适用细胞 | 常规贴壁细胞系 | 高增殖细胞(如HEK293) | 淋巴细胞、杂交瘤 |
| 版本类型 | 特点 | 适用场景 |
|---|---|---|
| MEM(低糖) | 1.0 g/L葡萄糖 | 神经元、原代细胞 |
| MEM(高糖) | 4.5 g/L葡萄糖 | 肿瘤细胞、快速增殖系 |
| MEM NEAA | 含非必需氨基酸 | 杂交瘤、难养细胞 |
| MEM α | 改良版(含核苷酸、抗坏血酸) | 干细胞、骨细胞分化 |
血清替代方案:
无血清培养可添加 1× ITS 或 0.1% BSA。
谷氨酰胺稳定性:
使用 Glutamax(稳定型谷氨酰胺) 替代标准L-谷氨酰胺(每2周补加)。
液体MEM:4℃避光保存(含谷氨酰胺时≤1个月)。
干粉MEM:室温储存,配制后需过滤除菌(0.22 μm)。
不建议!悬浮细胞(如Jurkat)更适合 RPMI-1640,MEM缺乏悬浮生长所需的特定因子。
MEMα:
额外添加 核苷酸、抗坏血酸、脂类,适合干细胞和分化实验。
标准MEM:
仅含基础营养,适合常规细胞系。
可能原因:
血清批次差异 → 更换FBS或提高至15%;
培养皿未包被 → 使用多聚赖氨酸或胶原蛋白包被。