F10培养基(Ham's F-10 Nutrient Mixture)是一种经典的复合培养基,由Ham于1963年开发,专门为低密度细胞培养和原代细胞设计,尤其适用于哺乳动物细胞克隆培养和特殊细胞类型的维持。
低血清适应性:可在5-10%血清条件下支持细胞生长(部分细胞可低至2%)。
丰富的营养成分:含多种氨基酸、维生素、微量元素(如锌、铜)及次黄嘌呤。
缓冲系统:含NaHCO₃(需5% CO₂环境),部分版本含HEPES(适合无CO₂操作)。
低葡萄糖:1.0 g/L(适合代谢敏感的细胞)。
| 细胞类型 | 应用场景 |
|---|---|
| 原代细胞 | 成纤维细胞、肝细胞、肾上皮细胞 |
| 生殖细胞 | 卵母细胞、精子细胞培养(如试管婴儿技术) |
| 肿瘤细胞 | 某些低代谢需求的肿瘤细胞系 |
| 干细胞 | 间充质干细胞(MSCs)早期扩增 |
| 培养基 | F10 | DMEM | RPMI-1640 |
|---|---|---|---|
| 葡萄糖 | 1.0 g/L(低糖) | 4.5 g/L(高糖) | 2.0 g/L |
| 血清需求 | 5-10% FBS | 10% FBS | 5-10% FBS |
| 特点 | 含次黄嘌呤、微量元素 | 高营养,快速增殖 | 适合悬浮细胞 |
| 适用细胞 | 原代细胞、生殖细胞 | 肿瘤细胞、HEK293 | 淋巴细胞、骨髓细胞 |
培养基配制:
F10 + 10% FBS + 1% Pen/Strep + 2 mM L-谷氨酰胺
培养条件:
37°C, 5% CO₂,胶原蛋白包被培养皿(原代细胞需降低胰酶消化时间)。
优化配方:
F10 + 10% FBS + 0.5 IU/mL FSH + 50 ng/mL EGF + 0.25 mM丙酮酸钠
培养环境:
37°C, 5% CO₂, 5% O₂(低氧模拟体内条件)。
标准版本含NaHCO₃:需5% CO₂环境维持pH 7.2-7.4。
无CO₂操作:选择含HEPES的版本(如Gibco 11550-043)。
L-谷氨酰胺:若培养基不含,需补充至2-4 mM(每2-3周补加)。
血清选择:原代细胞建议使用胎牛血清(FBS),肿瘤细胞可用小牛血清(CS)。
液体培养基:4°C避光保存,1个月内使用(含谷氨酰胺时稳定性降低)。
干粉培养基:室温储存,配制后需过滤除菌(0.22 μm)。
可以,但需补充:
生长因子(如bFGF、EGF) + 无血清替代物(如ITS、B27)。
F10:
含次黄嘌呤,适合克隆培养;
葡萄糖1.0 g/L(F-12为1.8 g/L)。
F-12:
含腐胺、亚油酸,更适合上皮细胞。