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F12培养基（Ham's F-12 Nutrient Mixture）是一种经典的复合培养基，由Ham于1965年开发，专为低密度细胞培养和原代细胞设计，尤其适用于上皮细胞、神经细胞和无血清培养。
核心特点与用途
关键特性
低血清适应性：可在1-5%血清条件下支持细胞生长（部分细胞可无血清培养）。
丰富的营养成分：含多种氨基酸、维生素、微量元素（锌、硒）及腐胺、亚油酸。
缓冲系统：含NaHCO₃（需5% CO₂环境），部分版本含HEPES（适合无CO₂操作）。
葡萄糖浓度：1.8 g/L（介于低糖DMEM和高糖DMEM之间）。
典型应用
| 细胞类型 | 应用场景 |
|---|---|
| 原代上皮细胞 | 前列腺上皮细胞、肾小管上皮细胞培养 |
| 神经细胞 | 与Neurobasal混合用于神经元培养 |
| 干细胞 | 间充质干细胞（MSCs）、肝干细胞 |
| 肿瘤细胞 | 前列腺癌（LNCaP）、肝癌细胞系 |
与其他培养基的对比
| 培养基 | F12 | DMEM/F12 | RPMI-1640 |
|---|---|---|---|
| 葡萄糖 | 1.8 g/L | 1.0-3.15 g/L | 2.0 g/L |
| 血清需求 | 1-5% FBS | 5-10% FBS | 5-10% FBS |
| 特点 | 含腐胺、亚油酸 | 高营养复合型 | 适合悬浮细胞 |
| 适用细胞 | 原代上皮细胞、神经细胞 | 类器官、干细胞 | 淋巴细胞、骨髓细胞 |
常见实验方案
（1）原代肝细胞培养
培养基配制：
F12 + 10% FBS + 1% NEAA + 10 ng/mL EGF + 1% Pen/Strep
培养条件：
37°C, 5% CO₂，胶原蛋白包被培养皿。
（2）无血清神经干细胞培养
优化配方：
F12:Neurobasal（1:1） + 2% B27 + 20 ng/mL bFGF + 2 mM Glutamax
培养环境：
37°C, 5% CO₂, 低氧（3% O₂）促进干性维持。
使用注意事项
（1）pH与缓冲系统
标准版本含NaHCO₃：需5% CO₂环境维持pH 7.2-7.4。
无CO₂操作：选择含HEPES的版本。
（2）添加剂建议
L-谷氨酰胺：若培养基不含，需补充至2-4 mM（每2-3周补加）。
无血清培养：需添加ITS（胰岛素-转铁蛋白-硒）或B27补充剂。
（3）储存条件
液体培养基：4°C避光保存，1个月内使用（含谷氨酰胺时稳定性降低）。
干粉培养基：室温储存，配制后需过滤除菌（0.22 μm）。
常见问题
Q1: F12能否完全替代DMEM？
视细胞类型而定：
上皮细胞、原代细胞：F12更优；
快速增殖细胞（如HEK293）：DMEM更合适。
Q2: 腐胺的作用是什么？
促进上皮细胞增殖：腐胺是多胺前体，支持DNA合成和细胞周期进展。
Q3: F12与F10有何区别？
F12：
含腐胺、亚油酸，适合上皮细胞；
葡萄糖1.8 g/L（F10为1.0 g/L）。