DPBS是PBS的改良版本,由Dulbecco在PBS基础上调整磷酸盐浓度,专为细胞培养相关操作优化,具有更强的缓冲能力和生理兼容性。
| 特性 | DPBS | 标准PBS |
|---|---|---|
| 磷酸盐浓度 | 更高(增强缓冲能力) | 基础缓冲能力 |
| 渗透压 | 严格匹配生理值(~290 mOsm/kg) | 可能略有波动 |
| 细胞接触时间 | 可延长至1-2小时(普通PBS≤30分钟) | 仅推荐短时操作 |
| 常见配方 | 含Ca²⁺/Mg²⁺和不含两种版本 | 通常不含Ca²⁺/Mg²⁺ |
① 细胞实验
细胞传代前的洗涤(去除血清抑制胰酶活性)
流式细胞术样本清洗(DPBS+0.5% BSA)
免疫荧光染色漂洗(DPBS比PBS减少背景)
② 分子生物学
核酸杂交膜冲洗(DPBS-Tween:0.1% Tween-20)
蛋白结晶筛选(等渗性减少晶体变形)
③ 特殊版本用途
含Ca²⁺/Mg²⁺ DPBS:细胞迁移实验(Transwell)
无Ca²⁺/Mg²⁺ DPBS:胰酶消化终止液配制
质控标准
| 指标 | 合格范围 | 检测方法 |
|---|---|---|
| pH值(25°C) | 7.2-7.4 | pH计校准后测量 |
| 渗透压 | 280-300 mOsm/kg | 渗透压仪 |
| 内毒素 | <0.25 EU/mL | LAL试剂盒 |
| 无菌性 | 无微生物生长 | 37℃培养72小时(TSA平板) |
Q1: DPBS可否高压灭菌?
可以(121°C 15分钟),但可能产生磷酸盐沉淀,推荐过滤除菌。
Q2: 含Ca²⁺/Mg²⁺版本何时使用?
需维持细胞间连接的实验(如原代细胞分离),但禁止用于胰酶消化(会抑制胰酶活性)。
Q3: 与HBSS如何选择?
DPBS:常规洗涤/稀释(更经济)
HBSS:需微量元素(如Zn²⁺)或延长细胞维持时使用