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哺乳动物细胞蛋白抽提试剂用于从培养的哺乳动物细胞中高效抽提总可溶性蛋白。
需要材料：
蛋白酶和磷酸酶抑制剂
2ml离心管
能达到10000g的离心机
细胞刮
注意事项：
1.温和的除垢剂裂解，产生的抽提物直接与BCA蛋白定量分析试剂或SDS-PAGE兼容。
2.抽提的可溶性蛋白处于非变性状态，可直接用于免疫沉淀反应和其他亲和纯化过程。
3.可透析，确保其与随后的分析系统兼容。
4.贴壁细胞可直接在板上裂解。
5.试剂已在几种不同类型的细胞系上进行了测试
6.蛋白质提取效率通常比冻融法和超声波法高。
7.抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
使用方法:
注意：取适当量的裂解液，放与4℃预冷，使用前数分钟内需加入酶抑制剂。
1.对于贴壁细胞，细胞刮刮下细胞，计数，并收集5×106 个细胞，600g 离心5分钟，尽量吸尽上清，用预冷的PBS重悬细胞，600g 离心分钟收集细胞，尽量吸尽上清，加入0.5ml的预冷的裂解液，用移液器吹打数下，冰上孵育30分钟, 10000g离心10分钟，取上清，即为蛋白提取物。
注意：可以直接将裂解液加入培养细胞的器皿中裂解细胞，具体操作如下，
A. 用移液枪小心吸去培养液，
B. 加入适量的预冷的PBS,
C. 用移液枪小心吸去PBS,
D. 按照下表加入裂解液，4℃孵育30分钟。
E. 将裂解液转入离心管中， 10000g离心10分钟，取上清，即为蛋白提取物。
对于悬浮细胞，计数，并收集5×106 个细胞，600g 离心5分钟，尽量吸尽上清，用预冷的PBS重悬细胞，600g 离心5分钟，尽量吸尽上清，加入0.5ml的预冷的裂解液，用移液器吹打数下，冰上孵育30分钟, 10000g离心10分钟，取上清，即为蛋白提取物。