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基础特性与选择标准
| 参数 | 要求 |
|---|---|
| 蛋白质含量 | ≥35% (w/w) |
| 脂肪残留 | ≤1% |
| 乳糖含量 | ≤50% |
| 微生物限度 | 需灭菌处理（γ辐照最佳） |
| 溶解性 | 完全溶于水（无颗粒） |
关键步骤：
使用预热的TBST（37-50℃）加速溶解
避免涡旋（易产生泡沫）
应用场景与优化
| 实验类型 | 推荐浓度 | 注意事项 |
|---|---|---|
| Western封闭 | 3-5% | 磷酸化蛋白检测需改用BSA |
| ELISA封闭 | 1-3% | 添加0.05% NaN₃防腐 |
| 核酸杂交 | 2% | 需65℃热处理30min除核酸酶 |
与BSA的对比
| 特性 | 脱脂奶粉 | BSA |
|---|---|---|
| 成本 | 低（$0.5/g） | 高（$5/g） |
| 封闭效率 | 中等（适合多数抗体） | 高（适合难封闭抗体） |
| 磷酸化蛋白兼容性 | 差（含磷酸酶） | 优 |
| 批次差异 | 大（需品牌标准化） | 小 |
| 问题 | 原因与解决方案 |
|---|---|
| 背景高 | 奶粉未完全溶解 → 延长水浴时间或提高温度至60℃ |
| 结块 | 直接倒入冷水 → 应先用少量温水调成糊状再稀释 |
| 信号弱 | 过度封闭（>2h）→ 缩短至1h或降低浓度至3% |
| 微生物污染 | 储存时间过长 → 分装冻存，使用前0.45μm过滤 |