产品介绍
蛋白质银染检测试剂盒是一种用于聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）中蛋白质染色的高灵敏度检测工具，其原理是通过银离子（Ag⁺）与蛋白质结合，经还原反应形成金属银颗粒，在凝胶上形成棕黑色或黑色条带，灵敏度比考马斯亮蓝染色高50-100倍，可检测低至0.1-1 ng的蛋白质。
常见试剂盒组成
固定液（如乙醇/乙酸或三氯乙酸）：去除凝胶中的SDS和杂质。
敏化液（如戊二醛或硫代硫酸钠）：增强蛋白质与银离子的结合能力。
银染液（硝酸银溶液）：银离子与蛋白质结合。
显色液（甲醛/碳酸钠）：还原银离子形成可见的金属银沉淀。
终止液（如EDTA或甘氨酸）：终止显色反应。
洗涤缓冲液（如蒸馏水或Tris缓冲液）：步骤间清洗凝胶。
产品保存： 4℃保存，一年有效。银染液和显色液A需避光保存。
使用步骤
1.电泳结束后，取凝胶放入约100ml固定液中，在摇床上室温摇动20分钟，摇动速度为60-70rpm。
固定液的配制：加入50ml乙醇、10ml冰乙酸和40ml 去离子水，混匀。
2.弃固定液，加入100ml 30%乙醇，在摇床上室温摇动10min，摇动速度为60-70rpm。
30%乙醇的配制：70ml 去离子水中加入30ml乙醇，混匀。
3.弃30%乙醇，加入200ml去离子水，在摇床上室温摇动10分钟，摇动速度为60-70rpm。
4.弃水，加入100ml增敏液(1×)，在摇床上室温摇动2分钟，摇动速度为60-70rpm。
增敏液(1×)的配制：99ml去离子水中加入1ml增敏液(100×)，混匀。增敏液(1×)配制后需在2小时内使用。
5.弃原有溶液，加入200ml 去离子水，在摇床上室温摇动1min×2，摇动速度为60-70rpm。
6.弃水，加入100ml银染液(1×)，在摇床上室温摇动20分钟，摇动速度为60-70rpm。
银染液(1×)的配制：99ml 去离子水中加入1ml银染液(100×)，混匀。银染液(1X)配制后需在2小时内使用。
注意：若染色灵敏度不理想，可以在稀释好的银溶液（1×）中加入0.05ml的显色液A,然后再染色。
7.弃原有溶液，加入100ml 去离子水，在摇床上室温摇动0.5min×2，摇动速度为60-70rpm。
8.弃水，加入100ml显色液，在摇床上室温摇动3-10分钟，直至出现比较理想的预期蛋白条带，摇动速度为60-70rpm。
显色液的配制：80ml 去离子水中加入20ml显色液B(5×),再加入0.05ml显色液A，混匀后即为显色液。显色液配制后需在20分钟内使用。
9.弃显色液，加入100ml终止液，在摇床上室温摇动10分钟，摇动速度为60-70rpm。
终止液的配制：95ml 去离子水中加入5ml冰乙酸,混匀。
10.弃终止液，加入去离子水，在摇床上室温摇动2-5分钟，摇动速度为60-70rpm。
11.保存显色出的蛋白质条带并记录。
注意事项：
1.需自备乙醇和冰乙酸（分析纯）。
2.请严格按照产品使用说明书进行操作。
3.显色过程很快，要注意把握时间，避免染色过度。
4.所用器皿要很洁净，不用手直接接触，以免杂蛋白污染。
5.尽量用高纯度去离子水，蒸馏水更佳，可以减少背景着色。
6.本试剂盒也可以用于2D凝胶的银染，并且染色后和后续的质谱检测兼容。
7.使用说明中的使用次数及各种溶液的使用量适用于大小为8×10cm厚度为0.75-1mm的凝胶。对于更大的凝胶，各种溶液的使用量需按凝胶面积的比例放大，对于更厚的凝胶，作用时间需按照厚度的比例适当延长。
8.对于BSA蛋白，检测灵敏度可以达到0.5ng
9.使用本试剂盒只需90分钟即可完成银染实验。