产品简介
IP细胞裂解液是一种比较温和的裂解液，温和配方有助于维持蛋白复合物及蛋白完整构象。IP细胞裂解液的主要成分为25mM Tris(pH7.4)，150mM NaCl，1% NP-40等。
产品特点：
1.裂解缓冲液能有效地增溶细胞蛋白，但不释放基因组DNA或破坏蛋白质复合物。
2.此裂解液能有效兼容许多应用，包括pull-down，Elisa，免疫沉淀，免疫共沉
淀，免疫印迹，报告分析，蛋白纯化，BCA蛋白定量等。
材料需要：
蛋白酶和磷酸酶抑制剂
2ml离心管
组织研磨器
能达到13000g的离心机
注意事项：
1.抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
2.裂解得到的蛋白样品，含有较高浓度的去垢剂干扰，不建议用Bradford 法测定蛋白浓度，可以选用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。
3.本试剂能提取大部分经常研究的蛋白质抗原，但对于大分子多聚抗原则无效。
4.该裂解液不包含蛋白酶和磷酸酶抑制剂，如果需要，需自行准备。
使用方法：
取适量裂解液，在使用前数分钟内加入酶抑制剂。
细胞样品：
1.对于贴壁细胞，培养好的细胞吸去培养液后，加入预冷的PBS洗两次，加入适量提取试剂（试剂用量见下表格），用移液器吹打数下，把细胞吹散，冰上裂解10分钟。充分裂解后，
裂解物移入预冷的微型离心管中，4℃，13000g离心10分钟，取上清，即为蛋白提取物。
2.对于悬浮细胞，离心（1000g，5min）收集细胞，用预冷的PBS洗两次，离心（1000g，5min），收集细胞，加入适量裂解液，每100万个细胞加入100ul的裂解液。用移液器吹打数下，把细胞吹散，冰上裂解10分钟，期间拿出涡旋震荡数次，充分裂解细胞。充分裂解后，4℃，13000g离心10分钟，取上清，即为蛋白提取物。
组织样品：
1.把组织剪切成细小的碎片。
2.按照每0.1g组织加入1ml裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
3.用玻璃匀浆器匀浆，冰上裂解10分钟，直至充分裂解。
4.充分裂解后，13000g离心10分钟，取上清，即为蛋白提取物。
故障排除：
问题 | 可能原因 | 解决办法 |
蛋白总含量低 | 一些细胞比其他细胞更难溶解 | 充分悬浮细胞沉淀，延长裂解时间，增加涡旋振荡次数 |
蛋白浓度低 | 加入过多的裂解缓冲液 | 减少裂解缓冲液的用量 |
蛋白水解 | 没有加入蛋白酶抑制剂 | 加入蛋白酶抑制剂 |
没有磷酸化蛋白 | 没有加入磷酸酶抑制剂 | 加入磷酸酶抑制剂 |