超敏ECL化学发光显色试剂盒

产品介绍

超敏ECL化学发光试剂盒，是一款具有超高灵敏度的化学发光(ECL)底物，可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶发生化学反应，发出荧光，从而可以通过用X光片压片或CCD成像仪检测样品, 当底物与优化的抗体浓度和封闭缓冲液配合使用时，可检测到常规ECL底物无法检测的低丰度靶蛋白。

产品保存：4℃避光保存，一年有效。
产品规格： 50ml工作液（可用于500cm2的膜）

                  溶液A      25ml         

                  溶液B      25ml

产品特点：

1.用于辣根过氧化物酶(HRP)的化学发光底物
2.使用适当的一抗和二抗时，可在NC膜或PVDF膜上检测丰度为低皮克级的蛋白条带
3.所得信号的可定量检测范围跨越两个数量级
4.通过胶片或成像系统进行曝光，易于捕获图像
5.试剂盒组分能够在4℃条件下稳定放置一年

6.配方经过优化，可适用于浓度极低的抗体检测

注意事项：

好的免疫印迹结果需要优化实验条件，包括样品量，凝胶类型，转移方法，膜类型，封闭剂，洗涤缓冲液，一抗浓度，二抗浓度和孵育时间等。

1.为获得最佳效果，在孵育步骤中使用摇床。

2.不要使用叠氮化钠作为缓冲液的防腐剂，它会抑制HRP的活性。

3.始终戴上手套或使用干净的塑料镊子，金属装置必须没有可见的生锈痕迹，这写都可能导致斑点或高背景。

4.工作液暴露在阳光下或任何其他强光下都可能损害工作液使用效果。

5.由于封闭剂与抗体的交叉反应引起非特异性信号，所以实验测试对于确定每种蛋白质印迹系统的适当封闭剂是至关重要的。

6.当使用抗生物素蛋白/生物素系统时，避免使用牛奶作为封闭剂，牛奶中含有不同量的内源性生物素，导致高背景信号。

7.使用足够量的洗涤缓冲液，封闭缓冲液，抗体溶液和底物工作溶液来覆盖印迹膜并确保其不变干。使用大体积的封闭和洗涤缓冲液可以使非特异性信号最小化。

8.将Tween-20洗涤剂（终浓度为0.05-0.1％）加入到封闭缓冲液和所有稀释的抗体溶液中，以减少非特异性信号。

实验小妙招：

1.A液和B液吸取过程中必须更换移液器枪头，避免相互污染失效。

2.A液和B液混合为工作液后，需避免强氧化剂如次氯酸钠等对工作液的影响。

3.须确保试剂瓶干净，无微生物或其它试剂污染。

4.为了您的安全，请穿实验服并佩戴一次性手套。

需要材料：

NC膜或PVDF膜

X射线胶片或成像系统

摇床

洗涤缓冲液：含有0.05-0.1％吐温20的洗涤液，PBS：10mM磷酸钠，150mM NaCl，pH7.2

TBS：10mM Tris，150mM NaCl，pH7.4

特异性的一抗，用洗涤缓冲液或封闭缓冲液稀释

HRP标记的二抗，特异性针对一抗，用洗涤缓冲液或封闭缓冲液稀释

封闭液：洗涤缓冲液中1-5％（w / v）封闭剂（例如酪蛋白，BSA或脱脂奶粉）