产品详情实验步骤说明书下载
产品介绍
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（SDS-PAGEprotein Loading buffer）5X,是一种以溴酚蓝为染料的5倍浓液的蛋白上样缓冲液，试剂中含有SDS，DTT，甘油，溴酚蓝，Tris-HCL缓冲液等，可用于常规的SDS－PAGE蛋白样品上样。
使用方法：
1.在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE上样缓冲液(5X)。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2.按照每4微升蛋白样品加入1微升蛋白上样缓冲液(5X)的比例，混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(5X)。
3.100℃或沸水浴加热3-5分钟，以充分变性蛋白。
注意：如果起始时细胞或组织的用量较大，基因组DNA含量较高，煮沸3-5分钟后有可能仍然比较粘稠或者有粘稠状的半透明物体。此时需要再煮沸5-10分钟或者加入适量稀释成1X的蛋白上样缓冲液后再煮沸3-5分钟。充分煮沸后一方面可以使结合在基因组DNA上的蛋白充分释放，同时会导致基因组DNA的部分断裂从而使粘稠感消失，这样就不会影响后续的上样操作了。
4.冷却到室温后，直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
5.通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
注意事项：
1.蛋白上样缓冲液中含有少量DTT，有轻微剌激气味。
2.SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)必须完全溶解后再使用。
3.为了您的安全和健康，请戴一次性手套在通风厨内操作。