EDTA脱钙液

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产品名称 EDTA脱钙液
产品货号 PM0283
产品规格 500ml
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产品介绍


在病理实验制作切片时,我们会经常碰到一些含钙组织,而且钙十分坚硬。由于组织中的钙和石蜡之间的密度不同,含钙的组织一般不能直接制作切片。骨组织含钙量最多。除了骨组织之外其它组织也可发生钙化,在组织中形成钙化区,所以需要经过脱钙过程。脱钙是制作骨组织切片的重要环节,尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。

乙二胺四乙酸(EDTA)与羟基磷灰石结晶的外层钙结合,形成可溶性的非离子化合物,同时又促进晶体内层的结合钙向外转移。借助这种连续性的作用使羟基磷灰石晶体逐渐融解,pH中性时可起螯合作用。其特点是脱钙时间长,对骨组织的损伤少,酶活性(碱性磷酸酶)和细胞抗原性保存较好,制作的切片可用于组织化学和免疫组化分析。


主要用途:
用于骨组织、牙齿等脱钙。


规格:500ml


保存条件: 4℃保存 , 一年有效,避免阳光直射。



使用步骤

 

1.将骨组织截成0.5 cm×0.3 cm×0.2 cm大小骨片,生理盐水清洗后立即投入冷冻的固定液中,4℃固定12 h~24 h;固定结束后骨片在0.2 M磷酸缓冲液中充分漂洗。

2.漂洗后投入脱钙液中,室温下脱钙,每日检查脱钙情况,直至骨片脱钙完全为止。脱钙结束后,骨片用蒸馏水冲洗20 min,脱钙液每隔4-5天更换一次新液,经过3次更换新液后,此后每天更换新液,但请根据具体实验具体分析。以大头针能刺进骨密质为完成脱钙标准。

3.然后进入常规脱水处理程序并包埋、切片。

注意事项:

1.为使脱钙更为充分,每次最好更换新液,这既弃去了脱掉的钙盐,增加脱钙强度,又起到降低脱钙温度的作用。

2.脱钙时间以脱钙完成为标准:以大头针能轻易刺进骨密质为准。

3.脱钙温度不要太高,一般以室温(25℃)为宜,高温可加快脱钙速度,但可破坏组织中的核酸而影响染色效果。低温(4℃)则会减慢脱钙速度,使组织在脱钙液中浸泡过久而引起损伤。

4.为了提高 EDTA 的脱钙速度,骨组织取材尽量取薄。

5.为了提高 EDTA 的脱钙速度,也可以采用微波脱钙。用微波炉辅助脱钙可以大大缩短脱钙时间,以微波间歇脱钙,每次辐射1分钟,每次辐射之间都将烧杯移至室温,冷却5分钟,以保证每次的微波辐射脱钙液的温度不至于太高。脱钙时脱钙液温度过高,易导致假阴性,背景色深等缺点。因此,在时间要求不紧迫的前提下,该方法也不应是首选。

6.为达到骨组织既充分脱钙,又保护骨组织的抗原不受破坏,需要对含钙的组织充分固定之后再进行脱钙。然后再行常规制片。