AB-PAS染色是联合阿利新蓝(Alcian Blue,AB)和过碘酸雪夫(PAS)反应的双重染色技术,用于区分酸性粘多糖和中性粘多糖:
阿利新蓝(pH 2.5)
特异性染酸性粘多糖(含羧基或硫酸基)→ 蓝色
靶向物质:透明质酸、硫酸软骨素等
PAS反应
过碘酸氧化糖类的邻二羟基为醛基
Schiff试剂与醛基结合 → 紫红色(中性粘多糖/糖原)
复合显色
混合型粘多糖:蓝紫色(AB+PAS双阳性)
细胞核:苏木素复染(蓝色)
试剂盒组成:
阿利新蓝染液(pH 2.5)
1%过碘酸溶液
Schiff试剂
苏木素复染液
染色特异性控制
酶消化对照:
| 酶类型 | 靶物质 | 预期结果 |
|---|---|---|
| 透明质酸酶 | 透明质酸 | AB蓝色减弱 |
| 淀粉酶 | 糖原 | PAS紫红消失 |
常见问题处理
| 问题 | 原因 | 解决方案 |
|---|---|---|
| AB染色弱 | pH偏离 | 校准至pH 2.5 |
| PAS背景深 | 氧化过度 | 缩短至5min |
| 混合色不清 | 染色顺序错误 | 严格先AB后PAS |
特殊应用
黏液腺癌诊断:
肠型:AB+(蓝色)
胃型:PAS+(紫红)
角膜病理:区分角膜基质糖胺聚糖类型
| 染色结果 | 物质类型 | 常见定位 |
|---|---|---|
| 蓝色 | 酸性粘多糖 | 杯状细胞、软骨基质 |
| 紫红色 | 中性粘多糖/糖原 | 基底膜、糖原贮积 |
| 蓝紫色 | 混合型粘多糖 | 肿瘤性黏液 |
诊断价值:
肠上皮化生:AB+杯状细胞
腺癌分型:黏液化学特性鉴别

关键参数
| 组织类型 | AB时间 | PAS时间 |
|---|---|---|
| 胃肠黏膜 | 20min | 10min |
| 呼吸道 | 30min | 15min |
| 肿瘤组织 | 40min | 20min |
试剂保存
Schiff试剂:4℃避光(变红即失效)
阿利新蓝:室温保存(有效期6个月)
废液处理
含过碘酸废液:用10%硫代硫酸钠还原后排放
染料废液:按有机废液处理