阿利新蓝染液

阿利新蓝染色是一种特异性显示酸性粘多糖（酸性糖胺聚糖）的组织化学方法：

1. 化学结合机制

   • 阿利新蓝（含铜离子的酞菁染料）在酸性条件下（pH 2.5）

   • 与羧化粘多糖（透明质酸）和硫酸化粘多糖（硫酸软骨素、肝素）的阴离子基团结合

   • 形成不溶性蓝色复合物

2. pH依赖性

   • pH 2.5：标记羧化粘多糖（如透明质酸）

   • pH 1.0：仅标记硫酸化粘多糖（如硫酸角质素）

   • pH 0.5：特异性标记强硫酸化粘多糖（如肝素）

染色结果：

• 酸性粘多糖：亮蓝色

• 细胞核：红色（核固红复染后）

• 背景：无色或淡染

注意事项

1. 特异性控制

   • 酶消化对照：

     • 透明质酸酶处理（37℃ 1h）→ 羧化粘多糖阴性

     • 软骨素酶ABC处理→ 硫酸化粘多糖阴性

2. 常见问题处理

   问题现象	原因分析	解决方案
   染色过浅	pH偏离/时间不足	校准pH，延长染色
   背景着色	分化不足	增加分化至20s
   切片脱落	载玻片未包被	使用多聚赖氨酸载玻片

染色结果判读