PAS染液试剂盒

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产品名称 PAS染液试剂盒
产品货号 PM0349
产品规格 400ml
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PAS染色(Periodic Acid-Schiff Stain) 是一种特异性显示 多糖、糖蛋白、糖脂和黏蛋白 的组织化学染色方法,广泛应用于病理学(如糖原贮积病、真菌感染)和生物学研究。

染色机制

  1. 过碘酸氧化

    • 过碘酸(HIO₄)氧化糖类中的 邻二羟基醛基

  2. Schiff试剂反应

    • 醛基与Schiff试剂(无色品红)结合,形成 紫红色沉淀

  3. 复染(可选):

    • 苏木素或甲基绿复染细胞核,增强对比度。

染色结果

  • 糖原、黏液、基底膜、真菌细胞壁:紫红色

  • 细胞核:蓝色(苏木素复染后)

  • 背景:浅粉色或无着色

常见问题及解决方案

问题可能原因解决方案
无紫红色阳性信号过碘酸失效/Schiff试剂失效更换试剂,延长氧化或染色时间
背景过深Schiff试剂污染或未充分洗涤严格避光操作,延长亚硫酸氢钠洗涤时间
非特异性染色醛基残留(如福尔马林固定)增加亚硫酸氢钠洗涤或改用乙醇固定
切片脱落脱蜡不彻底或载玻片未包被优化脱蜡步骤,使用多聚赖氨酸载玻片


1. 样本准备
  • 组织固定:10%中性福尔马林或乙醇固定(糖原需乙醇固定避免溶解)。

  • 石蜡切片:4~5μm厚度,60℃烘片1小时。

2. 染色流程
  1. 脱蜡至水

    • 二甲苯→梯度乙醇→蒸馏水,每级5分钟。

  2. 过碘酸氧化

    • 1%过碘酸浸泡5~10分钟→蒸馏水冲洗2分钟。

  3. Schiff试剂反应

    • Schiff试剂避光浸染15~30分钟(室温)。

  4. 洗涤

    • 亚硫酸氢钠溶液(或流水)冲洗3次,每次2分钟→流水冲洗10分钟。

  5. 复染(可选)

    • 苏木素染核1~2分钟→流水蓝化10分钟。

  1. 脱水透明

    • 梯度乙醇→二甲苯,每级2分钟。

  2. 封片:中性树胶封片。

3. 镜检结果
  • 阳性物质(糖原、真菌等):紫红色

  • 细胞核:蓝色(复染后)

  • 阴性组织:无色或淡粉色

注意事项

1. 样本处理
  • 糖原保存:需用 无水乙醇固定(福尔马林会溶解糖原)。

  • 避免污染:操作中防止唾液或汗液污染(含糖原)。

2. 染色控制
  • 过碘酸时间

    • 过短(<5分钟)→氧化不彻底,假阴性;

    • 过长(>15分钟)→组织损伤。

  • Schiff试剂

    • 避光保存,变红即失效(应为无色或淡黄色)。

3. 试剂保存
  • Schiff试剂:4℃避光保存,有效期3~6个月。

  • 过碘酸:现用现配或分装避光保存(易分解)。